بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای S100 A8 , S100 A9 کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها
نویسندگان
چکیده مقاله:
زمینه و هدف: کالپروتکتین، S100 A8 و S100 A9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان S100 A8 و S100 A9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید. روش کار: در این مطالعه تجربی از pET15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای S100 A8, S100 A9 انسانی و از ( E.coli BL21 (DE3 به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از طریق SDS-PAGE مورد ارزیابی قرارگرفت. خالص سازی پروتئینها با استفاده از رزین Ni-NTA و بر اساس میل ترکیبی آن به His-Tag پروتئین های نوترکیب انجام گرفت. ساختار سوم پروتئین ها با طیف سنج فلورسانس بررسی شد. یافته ها: زیر واحدهای مذکور 4-3 ساعت بعد از القاء و دمای 37 درجه سانتی گراد بیان بالایی را نشان دادند. درصد بالایی از پروتئین S100A9 در فاز اینکلوژن بادی نشان داده شد، در حالیکه زیر واحد S100A8 عمدتا بصورت محلول بیان گردید. S100A8 و S100A9 در غلظت mM 100 ایمیدازول خالص سازی گردید. در بررسی طیف سنجی نشان داده شد که اسید آمینه تریپتوفان در ساختار های داخلی قرار گرفته و کمتر در معرض محیط آبی است. نتیجه گیری: در این مطالعه زیر واحدهای S100A8 و S100A9 بصورت نوترکیب بیان شده و تخلیص گردید. همچنین، ساختار آنها مورد تایید قرار گرفت.
منابع مشابه
بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای s۱۰۰ a۸ , s۱۰۰ a۹ کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها
زمینه و هدف: کالپروتکتین، s100 a8 و s100 a9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان s100 a8 و s100 a9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید. روش کار: در این مطالعه تجربی از pet15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای s100 a8, s100 a9 انسانی و از ( e.coli bl21 (de3 به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از ط...
متن کاملS100A9 (S100 calcium binding protein A9)
Note S100A9 belongs to the S100/calgranulin family of small non-ubiquitous cytoplasmic Ca-binding proteins of EF-hand type. The proteins were referred to "S100" because of their solubility in saturated ammonium sulphate solution. Sixteen of 21 members are localised in a cluster on human chromosome 1q21. The clustered organization of these S100 genes is conserved during evolution (Ridinger et al...
متن کاملDiagnostic Value of Fecal Calprotectin (S100 A8/A9) Test in Children with Chronic Abdominal Pain
Objectives. The aim of the study was to establish whether fecal calprotectin concentration (FCC) may be useful in children with chronic abdominal pain to differentiate between inflammatory bowel disease (IBD), other inflammatory gastrointestinal disorders, and functional gastrointestinal disorders. Methods. The study included 163 patients (median age 13 years), who were assigned to four study g...
متن کاملNeutrophil-derived S100 calcium-binding proteins A8/A9 promote reticulated thrombocytosis and atherogenesis in diabetes.
Platelets play a critical role in atherogenesis and thrombosis-mediated myocardial ischemia, processes that are accelerated in diabetes. Whether hyperglycemia promotes platelet production and whether enhanced platelet production contributes to enhanced atherothrombosis remains unknown. Here we found that in response to hyperglycemia, neutrophil-derived S100 calcium-binding proteins A8/A9 (S100A...
متن کاملElevation of human alpha-defensins and S100 calcium-binding proteins A8 and A9 in tear fluid of patients with pterygium.
PURPOSE The pathogenesis of pterygia is still not well understood. Recent studies suggest that it may be associated with inflammation and progressive proliferation triggered by ultraviolet radiation. In this study the authors determined that the inflammatory nature of pterygium is reflected in the protein components of tears. METHODS Consent for this study was obtained from 12 patients (avera...
متن کاملPReS-FINAL-2068: S100 A8/A9 serum levels reflect disease activity in juvenile idiopathic arthritis-associated uveitis
Methods Serum samples were collected from patients with juvenile idiopathic arthritis-associated uveitis (JIAU, n = 97), idiopathic anterior uveitis (IAU, n = 26), idiopathic intermediate uveitis (IIU, n = 36), anterior herpes uveitis (n = 3), and healthy controls (n = 10). In 29 patients, aqueous humor was available for analysis. S100 levels were measured by ELISA and were correlated with dise...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 14 شماره 2
صفحات 107- 117
تاریخ انتشار 2014-06
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023